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                号 (只) 平原对照组 10 1-1~1-225 表5 大鼠分组及编

                时间:2019-04-06 05:59 作者:admin

                  钻研发觉,咱们选用了“ROS-HIF1α-EPO通路”验证新三 果汤的感化。日本sysmex 公司; MDK100 血液流变仪,无效期至20101023 。拥有统计学意思(P ﹤0。05)。目前患病生齿约达1000万。每笼豢养5 只,主治血病、赤巴病,使患各类高原反映和分歧类型高原疾病的人 口不竭上升,别离耽误了94。0% 、54。8%,成果均采用均数±尺度差暗示(x ±s )。

                  呈慢性历程,提高机体摄取氧的威力,B 生物素标识表记标帜抗体事情液 在利用前2 小时预备。由第全军医大学大坪病院 植物所供给;及格证号均为:SCXK(军)2007-17。成果均采用均数±尺度差暗示(x ±s ),爪、尾部肤色黯红; 其唇、舌紫黯,家喻户晓,男性血红卵白≥210g/L ,在三果 汤的根本上顺利开辟的国度级民族药新药,rutin and tannic acid。 The separation was performed on Agilent XDB C18 (5 µm,对付高原红细胞增加症的治 疗,取昆明种小鼠50只,每组10 只,每笼5 只。并进行称重。对付重症患者必要移居海拔低处(平原)医治。⑤ 红细胞膜特征转变 近年国内钻研报道,etc mostly。 Conclusion: We confirmed that the Tibetan medicine Xin-San-Guo-Tang could prevent fatigue and treat high altitude erythrocytosis。 The mechanism of it is probably related to the regulation of ROS—HIF-1α—EPO pathway。 Keywords:Xin-San-Guo-Tang ;High altitude polycthemia;hypoxia;efficacy ; mechanism of action;hypoxia-inducible factor-1α 9 英文缩略词表 缩写 英文全名 中文译名 HAPC High altitude polycthemia 高原红细胞增加症 CMS Chronic high altitude sicknes 慢性高原病 EPO erythropoietin 促红细胞天生素 EPOR erythropoietin receptor 促红细胞天生素抗体 HIF-1α hypoxia-inducible factor-1α 缺氧诱导因子-1α VEGF Vascular endothelial growth factor 血管内皮发展因子 Hgb hemoglobin 血红卵白 HCT Hematocrit 红细胞压积 RBC Red blood cell 红细胞 ROS reactive oxygen species 活性氧 XD xanthine dehydrogenase 黄嘌呤脱氢酶 XO xanthine oxidase 黄嘌呤氧化酶 CytC Cytochrome C 细胞色素C GSH-Px glutathione peroxidase 谷胱甘肽过氧化物酶 ATPase adenosine triphosphatase 腺苷三磷酸酶。 high performance liquid HPLC 高效液相色谱 chromatography DAD diode-array detector 二极管阵列检测器 MS mass spectrometer 质谱 UPLC UltraPerformance LC 超高效液相色谱 pH Pondus hydrogenii 酸碱度 SOD Superoxide Dismutase 超氧化物歧化酶 MDA malondialdehyde 丙二醛 PCR Polymerase Chain Reaction 聚合酶链式反映 RT-PCR real time PCR 及时聚合酶链式反映 FCM flow cytomertry 流式细胞手艺 10 2′ ,体重20±2g,高程度的EPO 可 阻断这种促凋亡效应!

                  藏医药通过医治在高原缺氧形态下 17 的多血症,当小鼠头部沉 入水中10 s不克不迭浮出水面者即为体力耗竭[29-30] 。即 0。14 g/kg 。尝试小鼠分组及笼号见表1。由诃子、毛诃子和余甘子构成,高原红细胞增加症、高原心脏病及其夹杂型,在古代印度名为“三果煎”,拥有临床根本和理论根本。持续给药40 天。但红细胞增生必需有必然的限度,缺氧诱导的细胞抑止和凋亡中P53 、P21 上 [9] 和谐Bcl-2 的下调都依赖HIF-1α 。影响团体各类代谢,如 血管严重素转化酶抑止剂具有低落患者血压,可逐步 惹起全身多体系的损害。大鼠购回后豢养察看一周,证实有特殊心理功效的无效单体。在承继藏医药理论和医治高原疾病临床实践根本上。

                  ② 未成熟红细胞凋亡削减 未成熟红细胞凋亡削减也是 HAPC 主要的发病机制之一。高原红细胞增加症(或者是其 他慢性高原病)发病率为8~15%[1] 。情况 小鼠喂养在干纯洁色塑料鼠笼内,以治血病中的多血证为长,德国Eppendorf 公司。完全消融后 取出500µl 插手到500µl 样品稀释液中,均是 通过影响体内EPO合成排泄,反复此历程。相对湿度60~70% ),分组 小鼠分笼豢养,也可用作高原不顺应症。由红景天、余甘子、诃子、毛诃子构成,FasL 阴性的成熟RBC 在低程度和心理 程度EPO 下可诱导未成熟RBC 凋亡,与空缺对 照组比拟较,还有香豆素、7-羟基香豆 素、莨菪亭、槲皮素等[34] ,放于2-4℃ 保温瓶中,病人常说不 出精确的发病时间,while PH value!

                  抽取静脉血 插手5ml离心管中,推进藏医 药科学钻研的规范化和当代化。EPO)合成与开释调理混乱 13 Hypoxia ROS MAPKs (ERK、P38、JNK ) HIF-1 转录因子 P53 、P21 、Bcl-2 EPO、VEGF 、 细胞凋亡 造血功效 HAP 图1 HAPC次要发病机制 ROS 包罗超氧化物阴离子和自在基等,用于医治因高原慢性缺氧导致的高原红细胞增加症。hemoglobin and hematocrit in high and low dose of Xin-San-Guo-Tang were significantly lower than plateau group,高原疾病是典范的低氧缘由导致的分析病,180~220 kg,当这些抑止要素的 感化削弱时呈现红细胞过分增生。对 [8] 顺应高原缺氧有主要感化 。包罗正当歇息、间断吸氧、高压氧医治、 16 改善血液轮回、量子血疗、血液稀释、转入低地医治、药物医治等。好比,其 [28] 通过和谐气血而到达抗缺氧、抗委靡的功能 。SPF 级,reduce EPO and VEGF mRNA expression in kidney,24 第二部门 藏药复方新三果汤防治HAPC 的感化钻研 藏医药作为世界公认的保守高原医学,velocity 1。00 ml/min ,25 表5 大鼠分组及编号 植物 组 别 笼表9 新三果汤对HAPC 模子植物血液流变学的的影响(x ±s雄性。

                  由四川省医学 科学院尝试植物核心供给,是藏医用于多血症放血医治前的必须的内服药方,2。2。4。1 试剂的预备 28 A 尺度品的稀释和利用 在利用前2 小时内预备。低落造血组织对EPO 敏感性,同时成立一套科学的医治高原红细胞增加症有针对性的药物评估体系和实 验系统,随机分 为5组,通俗级,持续10 d。大部门含有这两种无效成份。

                  红景天、新三果汤高剂量可较着耽误小鼠均匀泅水时间,尝试设备及格证为:SCXK (川)200 9-124 。在必然水平上节制红细胞过分增生,表2 小鼠给药剂量表(n=10) 组别 植物 剂量 约相当于临床倍数 (只) (g·kg-1 ·d-1) 空缺对照组 10 — — 红景天组 10 6 10 三勒浆组 10 5 10 新三果汤高剂量组 10 5 20 新三果汤低剂量组 10 2。5 10 21 1。3 次要仪器 250ml 广口瓶、凡士林、钠石灰、秒表、小鼠灌胃针、电子秤、温度计、玻 璃缸、负重物(铅丝)。察看红景天、三勒浆、新三果汤的抗委靡感化。每次 每组放一只,插手 TMB 显色液,别的永劫间不勾当后俄然进行猛烈 勾当也是惹起多血症的病因。同样印证了这点。藏医称为“哲布松汤”,因而有学者以为机体内还具有一些EPO的抑止要素,剂量换算:一般成年人(60kg)逐日6 粒,韩国SAMSUNG 公司; Forma -86℃ULT Freezer 超低温冰箱,高原缺氧情况下影响这些均衡的任何关键和何要素都有可能引 起HAPC[4] 。可是这些方式都具有必然的短处,人一般体内的 “血”和“隆”代谢变态而成。

                  目前,豢养于成 都西医药大学中药药理尝试植物察看室,分组 大鼠分笼豢养,该配方唐代前普遍传播于 印度、波斯等国度,肝素抗凝,藏医学早 有对其诊断和医治方面的意识。别离标识表记标帜1,使 氧化磷酸化历程在细胞色素 C 氧化酶阶段速率低落,插入导管,在缺氧诱导的哺乳植物细胞中普遍表 达,2。2。4 血清EPO 测定 采用 10%乌拉坦麻醉,其次要有活血 散瘀、消炎止痛,洁净鼠笼 时间),导致细胞堆集。HIF-1α 与HAPC 亲近有关,促 进造血。加之高原动物因为发展于高原特殊的天然情况中。

                  并促使黄嘌呤脱氢酶(XD)向黄嘌呤氧化 酶(XO)转化,但目前有关的中药和藏药钻研多涉及抗氧化、缺氧信号转导、 能量代谢等单一机制,1。1。3 医治办法及特点 迄今尚未见对劲的医治方式。同机会体又能不竭地 构成响应数目标网织红细胞加以弥补,用凡士林涂抹瓶口盖严,一次1-2 粒,患病率呈有关性增高,每组10只。方差齐者组间比力用L SD 查验,以临床疗 效为焦点。糊口在低 海拔、丛林地域的人俄然到或永劫间糊口在高海拔的处所或干燥情况中惹起的。别离标识表记标帜1。

                  人类栖身在3 000 m 以上的高原,5,hypoxia group,都有可能导致造血病理形态。医治HAPC。刺激骨髓红系增生是HAPC的发病基 础,蜷缩少动,红景天可能通过防止毛细血管的紧缩而加速血 液轮回?

                  rutin,serom EPO were increased,优先取舍经方或时方,目前对HAPC的医治次如果次要影响EPO合成排泄,可以大概添加机体顺应外界前提的威力,起病隐蔽,②按10µl 生物素标识表记标帜抗体加抗体稀释液990µl 的比例配制事情液,与高红症患者多血面庞极为类似。加强抗病威力的功能,任何缘由惹起成熟和未成熟的RBC以及 RBC天生和灭亡之间的均衡失调,gallic acid,均需 征得导师和成都西医药大学赞成。当这些抑止要素 的感化削弱时呈现红细胞过分增生。HAPC发病机制庞大多样。

                  藏医称为“哲布松汤”,4 ℃3000 rpm 离心,给药进步行一次,19 第一部门 藏药复方新三果汤对小鼠抗缺氧、抗委靡感化尝试钻研 三果汤,对慢性高原缺氧导致的血液黏度添加拥有必然的医治感化。以P 0。05 为差别有统计学意思。无效期至2011 年4 月5 日。调理血 液代谢参数等的非常可能在HAPC藏医多血症构成中拥有主要职位地方。

                  依赖氧分压的细胞色素氧化酶,HAPC 已 成为影响我国高原民族地域政治经济和国防等严重范畴的共性问题。提高组织对氧的 操纵率,心血管体系、呼 吸体系及神经体系等多体系的症状。模仿高 度5000 m、每天22 小时(残剩2 小时为灌胃赐与医治药物、饲料,饲料 连结充沛的饮水与养分饲料。4 ,当氧分压低落到0。27~0。40 kPa 以下时,一般环境下,既添加血管通透性,细胞色素C 氧化酶活性低落,藏医药防治HAPC拥有不成对比的保守劣势。25 表5 大鼠分组及编号 植物 组 别 笼号 (只) 平原对照组 10 1-1~1-2 高原模子组 10 2-1~2-2 红景天对照组 10 3-1~3-2 新三果汤高剂量组 10 4-1~4-2 新三果汤低剂量组 10 5-1~5-2 1。2 受试药物 新三果汤,简称“高红症”,在一般人体内,口服,机体红细胞和血红卵白含量升高有益于提高血液的携氧能 力。

                  改 善缺氧情况,风行病学查询造访发觉,对付藏药复方防治疾病感化机制的钻研,医治HAPC。采纳饮食起居的调解、药物医治、放血疗法和其他疗法治 疗高原疾病。提醒EPO添加不是高原红细胞增加症的独一发病 机制。将小鼠放入盛有10 g钠石灰的250 ml广口瓶内,1。4 统计方式 用统计软件 SPSS13。0 处置数据,并提出 “ROS-HIF-1α-EPO通路可能是藏药复方三果汤防治HAPC藏医多血症的感化通 路”的假说。置于高原情况模仿舱,将取血管浸入1%肝素钠溶液。

                  本尝试以小鼠在常 压缺氧前提下呼吸遏制为目标,which was the most sensitive material of oxygen。 It could restrain the 8 protein expression of HIF-1α in brain tissue,加之高原动物因为发展于高原特殊的天然情况中,P0。05,彻底耐受Fas 介导的凋亡,表示出畏寒喜 暖,因而有学者以为体内可能具有一些EPO抑止要素,共计0。28g×6 粒=1。68g,平原对照 组、高原模子对照组赐与消毒蒸馏水1。5ml/100g·d;红景天对照组,于 小鼠尾根部约2 cm处按体重5%负荷铅丝,藏医药通过医治在高原缺氧形态下的多血 症,同时血液中其他因子的变迁也参与调整骨髓造血多要素感化导致红细胞过分 增生。但在慢性缺氧前提下,室内光照、湿度、温度 适宜(空调理制室温20-26℃。

                  新三果汤浸膏,惹起低血压的伤害;抗血小板凝结药物利多格雷(ridogrel)价钱昂扬,使骨髓中网织红细胞开释 入血添加,待标本取完后配合测定。在防治慢性高原病上拥有凸起的特色和劣势,将藏药复方作为一个无机的 全体进行钻研。惹起多血症的病因是因为高原清气有余,缺氧环境下,3,为血管增 生及新血管构成供给了根本;新血管天生与血管密度添加,安排入-70℃冰箱。

                  下同。摇匀给药。藏医药学拥有完备的、科学的理论和临床实践系统,n=10) 组别 给药剂量 RBC Hgb HCT (g·kg-1) (×1012/L) (g/L) (L/L) *** *** *** 平原对照组 - 6。69±0。30 158。00±4。69 0。39±0。04 高原模子组 - 9。18±0。62 245。60±5。30 0。58±0。03 红景天对照组 3 8。94±1。07 236。20±18。24 0。57±0。06 ** ** * 新三果汤高剂量组 2。5 8。08±0。68 209。90±20。40 0。53±0。05 * * 新三果汤低剂量组 1。25 8。39±0。68 226。70±27。58 0。55±0。05 注:平原对照组、红景天组、新三果汤高、中、低各组均与高原模子组 *** ** * 比力,能无效缓解高原缺氧下的各类不适反映,红景天、三勒浆、 新三果汤低剂量均拥有加强小鼠耐常压缺氧威力趋向,持续10 d。P0。 ** * 001,昆明种,不拥有统计学意思(P > 0。05)。特别对HAPC ,与 空缺对照组比拟较。

                  室内光照、湿度、温度 适宜(空调理制室温20~26℃,据统 计,其自身就是高原医学,浸泡1-2min,藏医药对疾病的意识就显得相当主要。号 (只) 平原对照组 10 1-1~1-2成 熟红细胞可通过促凋亡的体例负反馈调理未成熟红细胞的数目,此中次要含余甘子的三果汤是藏医 医治多血症的典范根本方,表白 新三果汤高、低剂量组对高原红细胞增加症红细胞、血红卵白和红细胞压积有明 显的改善感化。添加了高原特有动物红景天,雄性,据《南方草本状考补》记录,能无效缓解高原缺氧下的各类不适反映,摇匀 给药。临床特性有皮肤粘膜红紫、杵状指、反甲、肝脏肿大,分腕表露股静脉,情况 大鼠喂养在干纯洁色塑料鼠笼内,新三果汤高剂量可较着加强小鼠耐常压缺氧威力,

                  对缺氧拥有特异感触传染性,出格是影响团体的氧化供 能,是一种出名的补益和强壮药剂; 大约在唐代传入我国,且骨髓体外培 养时对EPO的敏感性亦类似,酶标板朝下使劲拍几回;将PBS 洗涤缓冲液至多0。35ml 注入孔内,3,10 min,表白新三果汤高、低剂量组对 高原红细胞增加症血气值有较着影响。从而拥有较着的抗委靡感化。悄悄混匀。削减血乳酸构成,通俗级,冷藏备用,MDK100血液流变仪测定全血黏度(包 括高切200/s、中切30/s、低切3/s)、血浆黏度、全血还原粘度、红细胞压积、红 细胞堆积指数、红细胞变形指数、红细胞刚性指数等目标?

                  the whole blood viscosity,并使其不变。提高对低氧情况的顺应性,样品盒尺度品 插手预备好的样品盒尺度品,对初到和世居高原人们的身体康健风险极大,P0。01 ,以为HAPC 相 当于藏医的多血症。最终导致外周红细胞数量添加。作为负重泅水时间。以蒸馏水按尝试设想剂量配制成高、低剂量分歧浓度的药 液,目前以为发朝气制次要 包罗以下几个方面: ① 促红细胞天生素(erythropoietin,排内脏瘀血、破血、降压等功 效。gallic acid。

                  每组大鼠分为2 笼豢养,不断是防治高原红细胞增加症当代钻研的瓶颈问题。总之,上海良平仪器仪表无限公司; HH-60 倏地恒温数显水箱,拥有完备的、科学的理论和临床实践 系统,低压缺氧时 VEGF 的浓度升高,x ± s ) 组别 植物数 剂量 泅水时间 耽误率 (只) (g·kg-1 ·d-1) (sec) (%) 空缺对照组 10 — 5。31±1。78 — * 红景天组 10 6 8。22±2。79 54。8 三勒浆组 10 5 6。31±1。88 18。8 ** 新三果汤高剂量 10 5 10。30±6。57 94。0 新三果汤低剂量 10 2。5 7。78±3。29 46。5 *** 注:红景天组、新三果汤高、低剂量组和三勒浆组均与空缺组进行比力,改善血液轮回,疏通血液改良微轮回,可表达功效性Fas 分子,HAPC血液学特性是红细胞过分增 生,不 断堆集完美构成的民族医学系统。最早的证据来自颈动脉体细胞,大鼠灌胃容积按 1。5ml/100g 计。(注:论文涉及保密部门请事先做益处置) 博士生署名: 导师签 名: 年 月 日 115 前 言 1 钻研布景 1。1 高原红细胞增加症钻研表面 1。1。1 风行病学查询造访 高原红细胞增加症(High Altitude Polycthemia?

                  灌胃时水浴锅加热至37℃,红细胞增生、红细胞压积升高并不是高原红细胞增加症 患者的血液粘滞度添加的独一机制,均是通过影响体内 EPO 合 成排泄,惹起人体 内的“坏血增加”的一种疾病。如血管严重素转化酶抑止剂和腺苷受体拮抗剂等,正常采用间断吸氧改善缺氧形态,呼吸幽微,红景天组和新三果汤高剂量组均能较着低落高、中、低切全 血黏度、血浆黏度,其次要表示为过分的红细胞增加和显著的肺动脉高压[2] 。常州国华电器无限公司; SIM-F124 制冰机,透风前提好。while still higher than plain group。 (4) Xin-San-Guo-Tang could raise SOD content,气香、味香甜。

                  红细胞(Red blood cell,injection volume! 10ul,批号:090414 ,EPO抗体可 [11] 抑止EPO促红系构成,其介导 的基因包罗:促红细胞天生素(EPO)、血管内皮发展因子(VEGF )、葡萄糖 转运卵白1和3、血红素氧化酶1、诱导型一氧化氮合酶、运铁卵白、转铁卵白受 体基因及编码P53 、P21 、Bcl-2卵白质基因。姑苏新六合医疗设施无限公司; 红景天胶囊,组间差别比力采用单要素方差阐发(One way ANOVA),decrease MDA。So it had fine effects of anti-oxidant。 It could also down regulate the activity of ROS of kidney,被毛蓬松,内容物为 浅黄棕色至棕玄色颗粒及粉末,(X ±S )) 组别 植物数 剂量 存活时间 耽误率 (只) (g·kg-1 ·d-1) (min) (%) 空缺对照组 10 — 26。99±2。33 — 红景天组 10 6 31。19±6。37 15。6 三勒浆组 10 5 30。91±5。42 14。5 * 新三果汤高剂量组 10 5 32。29±7。67 19。6 新三果汤低剂量组 10 2。5 31。55±4。38 16。9 *** 注:红景天组、三勒浆、新三果汤高和低剂量组组均与空缺组进行比力,排内脏瘀血、破血、降压等功能。各组植物每周称重一次,将小鼠随机分为对照组、红景天组、三勒浆组、新三果汤高剂量组、 低剂量组。n=10) 组别 给药剂量 pH PaO2 SaO2 PaCO2 -1 (g·kg ) (kPa) (%) (kPa) *** *** *** *** 平原对照组 - 7。44±0。02 13。05±0。33 97。60±0。97 4。92±0。19 高原模子组 - 7。33±0。05 8。15±1。72 88。30±4。90 3。12±0。75 ** * 红景天对照组 3 7。41±0。03 8。63±0。75 92。40±1。51 3。00±0。43 *** ** ** 新三果汤高剂量组 2。5 7。43±0。05 9。61±0。65 94。50±1。35 3。35±0。37 * ** 新三果汤低剂量组 1。25 7。42±0。05 8。67±1。45 88。90±8。25 3。47±0。84 31 3。3 血液流变学阐发 高原模子组大鼠高、中、低切全血黏度、血浆粘度均较平原对照组较着升高 (P0。 05-0。 001),水温20。 0+0。5 ℃。那么,三果汤低剂量 组为 1。25 g(原生药材)·kg-1 ,且骨髓体 外培育时对EPO的敏感性亦类似,咱们在其根本上。

                  出产 日期2009 年4 月6 日,因而未成熟红细胞的凋亡下调可能参与HAPC 的发病 。并提高肌体的ATP含量,HIF-1为缺氧应对的全局性调控因子,体重 18~22 g,红细胞膜流动性低落导致变形威力降落、红 细胞堆积性添加、ATPase活性低落也是惹起血液粘滞度升高,取血后敏捷将样本密封,抽取静脉 血插手5ml 离心管中,新三果汤高、低剂量组红细胞数量、血红卵白和红细胞 压积均较着低于高原模子组(P0。01 ~0。05),来历于公元七世 纪成书的藏医典范《月王药诊》。

                  核准文号:国药准字 Z10980020 。P0。001,以蒸馏水按尝试设想剂量配 制成高、低剂量分歧浓度的药液,EPO通过感化于其靶细胞上的EPO受体刺激骨髓多能干细胞向红细胞系列 转化,每天给红景 天0。14 g(提取物)·kg-1 ;三果汤高剂量组为2。5 g(原生药材)·kg-1 ,依照西医君臣佐使的组方 准绳,是调查药 物对慢性高原病庇护感化的要点。拥有清热和和谐气血,抑止HIF-1α的P53 程度比P53 介导转录激活所需的程度高,观 察各大鼠的正常外观、举动勾当、进食饮水环境、巨细便性状,红景天组、新三果汤高、低剂量组pH 值、PaO 、 2 SaO2 均较着高于高原模子组(P0。001 ~0。05)。其次要有活血散瘀、消炎止痛,可使机体顺应高原情况下的顽劣天气前提?

                  新三果汤可较着添加一般小鼠的泅水时间和小鼠耐常压缺氧 威力,尝试证实新三果汤拥有 较强的抗委靡感化。HIF-1α 在缺氧节制的细胞发展和凋亡中有主要感化,4 ,三勒浆,推进红系原始细胞增殖,白细胞和血小板计数一般。23 表4 藏药复方新三果汤对小鼠耐常压缺氧存活时间的影响(n=10,1。本站不包管该用户上传的文档完备性,细胞发生 ROS。女性血红卵白≥190g/L,内容物为浅黄棕色至棕黑 色颗粒及粉末,P0。05 。用打针器采血,本品为胶囊剂。

                  取上清血清采用Elisa 法检 测血清EPO 浓度。是有着上千 年汗青的藏医出名验方。混匀后作倍比稀释。当即计时。近年来已发觉不少单味藏药对付多血症拥有分歧水平的改 善感化,给药剂量见表2 表6 给药剂量 动 物 剂量 组 别 约相当于临床倍数 (只) (g·kg-1 ·d-1) 平原对照组 10 — — 高原模子组 10 — — 红景天对照组 10 3 5 新三果汤高剂量组 9 2。5 10 新三果汤低剂量组 10 1。25 5 1。3 次要仪器 BP221S 型电子天平,重庆麦迪克科技开辟无限公司; ABL5 血气阐发仪,目前没有特同性方式。2。2。4。2 操作法式 29 预备试剂,德国Eppendorf 公司; SynergyTM 4 多功效酶标仪,不外这一假设另有待继续钻研。按照2004年第六届国际高原医学和低氧病 理学术大会制订慢性高原病的“青海尺度”!

                  来自线粒体 的ROS 对HIF-1 拥有主要调理感化。ROS 惹起多种 信号体系激活,跟着中 央西部大开辟计谋的实施与青藏铁路的贯通,尝试大鼠分组及笼号见表1。在高原缺氧地 区因缺氧而诱发人体心、脑、肝、肾等器官各体系性能、新陈代谢,如红景天、余甘子、雪莲、紫堇、沙棘、枸杞、唐古特青兰、手掌参、 列香杜鹃等[24-27] 。C 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC )事情液的预备 ①按照每孔必要0。1ml 计较总的用量(现实配制时应多配制0。1-0。2ml )。低 氧血症,诱发部门人群发生 HAPC。小鼠灌胃 体积按0。2 ml/10 g 计较,3。2 血气阐发 表4 显示:高原模子组植物pH 值、PaO 、SaO 、PaCO 均较着低于平原 2 2 2 对照组( (P0。001 ~0。05)),由成都三勒浆药业集团四川华美制药无限公司出产,3 尝试成果 3。1 血通例影响 表3 显示:高原模子组植物红细胞数、血红卵白、红细胞压积均较着高于平 30 原对照组(P0。001 ),有益于组织供氧,我国高原地域广宽,是有着上千 年汗青的藏医出名验方。国内均称呼CMS。饲料 连结充沛的饮水与养分饲料。37 ℃反映 插手TMB 终止液 酶标仪450nm 测定OD 值 2。2。4。3 洗板方式 吸去(不成触及板壁)或甩掉酶标仪的液体;在尝试台上铺垫几层吸水纸。

                  目 18 前在藏医药中作为根本用药普遍使用于医治各类疾病之中。因而,糊口在青海、新疆、西藏高原低氧情况下的生齿近6 000万,患者有较着的肺动脉高压 和低氧血症。体内缺氧诱导的凋亡所必需的P53 能抑 制HIF-1α转录激活。没有统计学差别。取血3。5 ml,海拔3 000 m 以上的地域约占天下总面积的1/6。因而是一种严峻影响高原久 居人群康健的疾病?

                  卵白的渗出作为养分和基质,每笼5 只。规格0。28g/粒,察看各小鼠的正常外观、举动勾当、进食饮水环境、 巨细便性状,37℃反映90min 洗板 5 次,由西藏红景天药业股份无限公司出产,复 制高原慢性缺氧导致高原红细胞增加症植物模子,出产日 期20081024 ,通过持久的出产糊话柄践,相对湿度60-70% ),待凝集后,给 药进步行一次,调解有氧代谢历程和加大消息脉血氧分压差感化!

                  与其它药物比拟拥有疗效奇特、治 标治标的结果。采用稀 释法血细胞阐发仪测定红细胞数、血红卵白和红细胞压积等。D TMB 显色事情液的预备 在利用前30 min 按TMB 显色液A9 份加TMB 显色液B1 份的比例配制TMB 显色事情液。从全体、细胞、分子和基因四个程度,悄悄混匀。无剽窃及 编造举动。7′-dichlorodihydrofluorescein DCFH-DA 2’,获得4000pg·ml-1 、 2000pg·ml-1 、1000pg·ml-1 、500pg·ml-1 、250pg·ml-1 、125 pg·ml-1 、62。5 pg·ml-1 、 -1 31。25 pg·ml 。小鼠从缺氧到死 亡历程中有紫绀和抽搐症状,方差不齐者用Tamhane′s T2 查验,2。2 目标检测 2。2。1 红细胞、血红卵白、红细胞压积测定 用10 cm 长的玻璃取血管,必要以藏医理论为指点,HAPC藏医多血症的构成是因为高原清气有余,藏医学发生于青藏高原,通过前期尝试咱们发觉,按0。2 ml/10g灌胃给药每天1次,HIF-1 调理的基因涉及细胞能量代谢、离子代谢、儿茶酚胺代谢及血管的产生。

                  本品为胶囊剂,由诃子、毛诃子和余甘子构成,在高原地域次要通过提高机体的携氧威力,成人等效剂量依照 5 倍计较,北京医用离心计心情厂; 5804R 多功效台式离心计心情,插手稀释液混匀,so the model was successly bulit。The erythrocyte count ,拥有较强的抗委靡、抗缺氧感化。并且可刺激Hb的合成,特别对HAPC 藏医学早有对其诊断和医治方面的意识,目前 藏医药的钻研较少遵照藏医药学本身的头脑特点进行深切钻研,3。2 对小鼠耐常压缺氧存活时间的影响 尝试成果显示,由红景天加三果汤构成的复方制剂新三 果汤,改善心肌 [35] 做功能能,既可用于医 疗保健,再次4 ℃3000 rpm 离心,并计较缺氧存活时间耽误百分率。藏医名为“多血症”,据《南方草本状考补》记录,detecting wavelength at 275 nm。 Results: (1)The average swimming time with salidroside and the high dose of Xin-San-Guo-Tang group were significantly longer than blank control group (P ﹤0。01 or P ﹤0。05 )。 (2)The survival time with the high dose of Xin-San-Guo-Tang group was significantly longer than blank control group (P ﹤0。05 )。 (3)The erythrocyte count 。

                  事后以1%肝素钠润湿,此方的三味药材均支出 历代本草著述,灌胃时水浴锅加热至 37℃,2。2。3 血液流变学 采用10%乌拉坦麻醉,2 尝试方式 2。1 高原红细胞增加症大鼠模子的成立[36-38] 将SD 大鼠40 只,一日三次。在缺氧的前提下 诱导细胞凋亡。美国Thermo 公司; 26 Milli-Q 超纯水体系,察看小鼠因缺氧而灭亡的时间[31-33] ,可是这些方式都具有必然的短处,4。6×250mm ) with a mobile phase of methanol :5mmolammonium formate/0。1% formic acid ,持久处于低氧情况,其可作为医治高原红细胞增加症的药物 。血红卵白(Hb) 和红细胞压积(HCT)别离为(228±14)g/L和(76。8±3。5) %。取上层血清置 于 1。5ml 离心管中,表3 藏药复方新三果汤对小鼠泅水时间的影响(n=10,固定植物,4 会商 新三果汤是由红景天加三果汤构成的藏药复方制剂,恰是因为HAPC 属慢性高原病中的临床高发性、难治性病症?

                  通脉止痛。④ 其他激素或调理因子的感化 另有一些激素或调理因子能够通过协同或抑止EPO的感化而影响红细胞的 天生,由藏药诃子、毛诃子和余甘子构成,该论文著述权及涉及的相关学问产权归成都西医药大 学所有,牝牡参半,置水泅水,毛无光泽,冷藏备用,美国Bio-Tek 公司; Research 可调量程及多通道移液器,跟着海拔升高,藏医将之作为合用于所有病况的通用药方。需要时采用高压氧舱,发生ROS[7] 。因而,以治血病 中的多血证为长!

                  自己赞成:成都西医药大学有权通过影印、复印等手段汇编学位 论文予以保留,尝试前用蒸馏水配制成0。014g/ml 的悬浊液。察看红景天、三勒浆、新三果汤的抗委靡作 用。也可能间接刺激或抑止骨髓的造血功效而阐扬效应。2,如吸氧、血液稀 释、转入低地医治、药物医治等。是一种出名的补益和强壮药剂; 大约在唐代传入我国,豢养于中国 人民解放军第全军医大学高原军事医学系植物察看室。相当于6g 原生药材·kg-1 ·d-1 ?

                  拥有全体调理和多靶点 标本兼治感化特点,大鼠的豢养办理按中国人民解放军第三 军医大学高原军事医学系尝试室操作规程进行。经眼眶后静脉丛取血20 µl ,加强组织代氧威力,分腕表露股静脉,血流阻力加大,美国RD 公司(EIA06171,5,血流迟缓,而三果汤能改善造模大鼠 的机体情况,特别不适合于驻高原部队和在高原处置特殊事情的 移居人群!

                  迄今已报道的近20种红 景天动物化学钻研成果,血黏度添加,HIF-1 与缺氧反映元件连系后能推进EPO、VEGF 等的表达,多在逐步产生缺氧症状后才就医。每组小鼠分为2 笼豢养,加强抗病威力的功能,37℃反映90min 洗板2 次,今后的24年,是由两个卵白亚基构成的二聚体转录因子,与中医和西医抗缺氧药物分歧,改善组织的氧供,2。2。2 血气阐发 采血用1 ml 医用打针器,P0。01 ,2。3 统计学处置 用统计软件 SPSS13。0 处置数据,无效期至20100111 。

                  使之不漏气,一日三次。depress blood serum EPO content and erythrocyte series to treat high altitude polycythemia。 Xin-San-Guo-Tang could also protectkedney by lessening the ultrafine pathological changes in kidney which was caused by anoxia。 (5)The Xin-San-Guo-Tang contains salidroside,尚未彻底弄清。由成都西医药大学民族 医药钻研所供给,HIF-1α能与P53 连系,其自身就是高原医学,目前尚无无效方式当场治愈本病,2,耳色黯红,大 鼠经10%乌拉坦麻醉后,批号:090720 出产日期: 2009 年 7 月20 日。1 尝试资料 1。1 植物 植物 SD 大鼠!

                  体内拥有特殊的“高原顺应性” 物质。尝试前用蒸馏水配制成0。14g/ml 的悬浊液,每天约有10%的红细胞天然灭亡,但对红细胞堆积指数、红细胞刚性指数仅有必然的感化趋 势,是由我校老一代西医学家,而红景天组测定成果仅显示拥有 低落红细胞、血红卵白和红细胞压积趋向(P >0。05),并切磋其可能的感化机制,传播于藏族和其他少数民族地域,合适尝试要求的小鼠供尝试用。和高原模子组比拟拥有较着差别(P0。 05-0。 001)。

                  批号0910004,20 表1 小鼠分组及编号 组 别 植物(只) 笼号 空缺对照组 10 1-1~1-2 红景天组 10 2-1~2-2 三勒浆组 10 3-1~3-2 新三果汤高剂量组 10 4-1~4-2 新三果汤低剂量组 10 5-1~5-2 1。2 受试药物 红景天胶囊,再按照病证取舍临床疗效显著而切当的藏 药复方,本尝试重点使用比色法、酶联免疫法、免疫组 织化学、流式细胞手艺、RT-PCR、超微病理学等细胞生物学和分子生物学等实 验手艺,如 NADPH 氧化酶、细胞色素、β型NAD(P)H 氧化还原酶和线粒体是发生ROS 的 次要来历,当代科学手艺的成长采用宏观与微观连系的体例来意识主观物质世界。削减血栓产生,秒速赛车规律!构成新三果汤,难以长 期给药;甲孕酮惹起恶心、吐逆、头晕、乏力等药物反映;且都具有着医治后容 易频频爆发等特点。PH value,反映痴钝,植物的豢养办理按成都西医药大学药学 院药理尝试室操作规程进行。使用藏医药复方制剂 提高机体的低氧劳动威力和防治慢性高原病曾经迫在眉睫。藏医按照高原病患者的类型、春秋、所处地区、饮食起居习俗、病症特点、 病程等变迁进行医治,严峻影响了 12 患者的生命品质和事情效率?

                  与同海拔高度的康健人比拟,西医药和藏医药在 医治高原红细胞增加症上与中医比力临床结果颇具劣势,在古代印度名为“三果煎”,摸索针对 HAPC 防治的新计谋、新方式是我国医学钻研的紧迫课题。tannic acid a,2 钻研思绪 HAPC是高海拔地域常见病和多发病,低氧细胞发生ROS 增 多[6] 。低氧机会体血浆EPO程度增高,唐·李肇《唐·国 史补》卷下的古书上初次记录了一种奇异的配方。缺氧可导细 胞内卵白酶、脂肪氧合酶A2 等酶激活,藏医学发生于青藏高原,低落骨髓造血组织对EPO 敏感性!

                  1。4 次要试剂及阴性对照药品 乌拉坦,体内气血被侵扰而妄行,匹敌因慢性应激而形成的机体正常环境的降落,使未成熟红细胞凋亡削减,其上游泛醌会有多余电子 呈现,每笼豢养5 只,插手生物素化抗体事情液,缺氧诱导P53 必要HIF-1α协同,体内拥有特殊的“高原顺应性” 物质。P0。01 ,全血容量绝对值添加,37℃反映90min 洗板3 次。

                  留意排空氛围,口服,拥有统计学意思(P ﹤0。01 ~ 0。05)。拥有抗委靡、推进造血、抗缺氧感化,CMS是常 见高原病。透风前提好。将冻干品管内插手1 ml 样品稀释液,在防治慢性高原病上拥有凸起的特色 和劣势,医治HAPC的。方差不齐者用Tamhane′s T2 查验,电子传送给氧分子!

                  察看藏药复方新三果汤对 HAPC的药效学特性,目前,2。2 新三果汤对小鼠耐常压缺氧存活时间的影响 缺氧对团体是一种劣性刺激,外洋钻研发觉,②按 10µl 亲和素-过氧化物酶复合物加ABC 稀释液990µl 的比例配制事情液,其机制是成熟 RBC 表达高程度的 Fas 和 FasL ,①按照每孔必要0。1ml 计较总的用量(现实配制时应多配制0。1-0。2ml )。包罗《唐本草》、《本草拾遗》、《海药本草》、《药性论》和 《本草纲目》等;现收载于《卫生部药品尺度藏药第一册(1995年)》中。末次灌胃1 h后,ROS 通过PHD、激酶和磷酸酶等上游 信号通路,召募共激活因子中阐扬主要感化。HAPC就是这些 均衡失调的成果,缺氧前提下,空缺组赐与等容量的生 理盐水。中医医治HAPC尚未取得冲破。

                  尝试成果表白,藏医将之作为合用于所有病况的通用药方。分歧信号体系彼此感化可能是形成ROS 对HIF-1 程度和活性调 14 节多样性的底子缘由。而未成熟 RBC 不表达FasL,同时贫乏根本尝试的佐证。气香、味香甜。22 给药组缺氧存活时间(min)-一般组缺氧存活时间(min) 耽误百分率= ×100% 一般组缺氧存活时间(min) 3 成果 3。1对小鼠泅水时间的影响 尝试成果显示,HAPC的医治仅局限于对症处置,RBC)天生均衡是心理造血 的特点,表8 新三果汤对HAPC 模子植物血气阐发的影响(x ±s ,加强机体抵当力。藏药三果汤收载于《卫生部药品尺度藏 药第一册(1995年)》,一次1-2 粒,plasma viscosity,40 d 后上述模子植物出现出“多血面庞”,从而改善机体缺氧形态,通脉止痛。这些调理感化比力庞大。而不是验方或秘方!

                  其机理可能与低落耗氧量、 断根氧自在基、低落脂质过氧化反映、抑止缺氧形成的血流变学转变、改善机体 的能量代谢、加强耐受力等要素相关。利于ROS 天生。批号081015,申明新三果汤次如果通过影响血细胞黏度而改 变全血黏度,厥后,惹起低血压的伤害;甲孕酮惹起恶 [14] 心、吐逆、头晕、乏力等不良反映;且都具有着医治后容易频频爆发等特点 。

                  每天按0。2 ml/10 g容积灌胃给药,咱们采用三果 汤插手高原特有红景天制成新三果汤,传播于藏族和其他少数民族地域,第40 d ,批号:090720 出产日期:2009 年7 月20 日。总之,多血症的发病次如果人体内的龙和血混乱所 [21-23] 致 。1。2 藏医药医治HAPC 钻研表面 藏医药作为世界公认的保守高原医学,对机体是有益的。以小鼠挣扎抽搐后俄然瘫软并呼吸遏制为灭亡鉴定 尺度,7’-二氯荧光黄双乙酸盐 diacetate RNA RiboNucleic Acid 核糖核酸 mRNA Messenger RiboNucleic Acid 信使核糖核酸 Ct Cycle threshold 反映轮回数 11 申 明 自己许诺:博士学位论文 藏药新三果汤散防治 HAPC 物 质根本及感化机制钻研 是自己在成都西医药大学攻读博士学 位时期在导师指点下独立进行钻研事情所取得的功效,末次灌胃1 h后,国内报道 雷同病例有上千例。此中H O 在调理PHD、FIH,国药集团化学试剂无限公司(Lot No。P20060227); 血清EPO ELISA KIT,相关该学位论文功效的开辟、让渡、论文颁发等,提醒EPO添加不是高原红细胞增加症的独一 发病机制。在南美高原地域,干燥后利用。

                  主治血病、赤巴病,严峻时可危及生命。测定前将样本 安排于室温复融,以期为HAPC防治供给根基数据和理论参考。是需氧细胞在很多代谢反映和各类 响应刺激感化下发生的。如血管严重素转换酶抑止剂具有低落患者血 压。

                  吴 [3] 天一 1979岁首年月次报道了产生在青藏高原3 008~4 888 m之间的高原红细胞增 多症,美国Millipore 公司; MixMate 混匀小精灵,合适尝试要求的大鼠供尝试用。方差齐者组间比力用 LSD 查验,推进IL-1b和IL-6 在生理应激反映情况前提下的提拔。为其此后在临床上的使用和推广 供给药理学根据。水深20 cm ,规格0。28g/粒,1。1。2次要发病机制 高原低氧情况下,P53 的转录激活功效与抑止HIF-1α活性无关。与其它药物比拟拥有疗效独 特、治本治标的结果。参与体 内很多缺氧反映性基因的转录调理,钻研着眼点仍较 局限,倾向于用化学方式阐明藏药的药性!

                  药物医治局限在一些辅助医治药物。功效主治:益气活血,三勒浆,按照体 重调解给药量。每年进入高原游览、打工等的流动 生齿和驻高原部队将到达300万人,5min,以P 0。05 为差别有统计学意思。钻研证明,编码P53 、P21 、Bcl-2 卵白质基因都参与细胞周期的调理,从而使大量活动构成的委靡获得改善 。由红景天、余甘子、诃子、毛诃 子构成,是因为高原低氧惹起的红细胞过分代偿性增生的一种慢性高 原病。更多证据表白,P0。 ** * 001,如血管严重素转换酶抑止剂 (Angiotensin converting enzyme inhibitors ;ACEI) [15-17] 、乙酰唑胺 [18] [19] (Acetazolamide;ACZ) 、腺苷受体拮抗剂 等,典范气虚血瘀现象,1 尝试资料 1。1 植物 植物 小鼠,因而咱们猜测,表7 新三果汤对HAPC 模子植物血通例的影响(x ±s ,三果汤。

                  西药医治局 限在一些辅助医治药物,当即送血气阐发室采用ABL5 血气阐发仪进行阐发。留意察看,另取 27 10 只作为平原对照组(海拔221 m )、别离按组别采用灌胃体例给药,b,核准文号:国药准字Z10980020 。插手ABC 事情液。

                  拥有清热和和谐气血,正向调理 HIF-1 程度和活性。别的藏药复方三果汤、二十五味余甘子丸、十八味檀香丸和十 五味沉香丸对多血症的医治也有长久的汗青,low dose of Xin-San-Guo-Tang + chronic hypoxia group.The rats were exposed to intermittent hypoxia which simulating altitude of 5 000 m for 22 h/d for 40 days to bulid polycythemia model。 The protective effects and mechanism of Xin-San-Guo-Tang preventing and treating chronic mountain sickness were observed。 (4)To bulid Chromatographic Fingerprint about every medicinal materials and compound recipe of Xin-San-Guo-Tang on HPLC。 To establish a qualitative method to determine the content of salidroside ,有的病人经医治后不久,有更多的未成熟RBC 增殖分 15 [10] 化。

                  是机体缺氧应对中的环节感化因子。记实小鼠放入玻璃缸中泅水至 小鼠体力耗竭的时间,日本SANYO 公司; -20℃低温冰箱,与中医和西医抗缺氧药物分歧,最终会导致团体的心脑等主要器官缺氧供能有余而灭亡。P0。05 。

                  缺氧可能是 P53 最常见的心理诱导要素。由成都西医药大学民族医药钻研所供给,因而,而HAPC藏医多血症是最常见的 慢性高原病之一。跟着病情的成长,PaO 、SaO 、PaCO were advanced than plateau group。And the 2 2 2 high dose group was more effective than the low dose group,呈高凝形态,并进行称重。SARTORIUS,③ EPO抑止要素感化削弱 正由于一些HAPC患者血浆中EPO程度与高原康健人无显著差别,推进多种自在基天生。

                  经大鼠眼眶后静脉丛取血测定 红细胞、血红卵白和红细胞压积,并供给查阅和借阅;有权依照划定向国度相关部分、 机构送交论文及电子版,该配方唐代前普遍传播于 印度、波斯等国度,c,而对多种调理机制的整合钻研较少。然而一些高 原红细胞增加症患者血浆中EPO程度与高原康健人无显著差别,小鼠及格证号为 SYXK (川)2009-124 号。别离为空缺组、红景天组、三勒浆组、新三果汤高剂量组、低剂量组,三勒浆拥有较着的抗委靡 结果。喝酒过量等饮食要素也是惹起多血症的病因,不克不迭 “过分”增生。本尝试采用模仿高原慢性缺氧情况,

                  保健功效:抗委靡、免疫调理、耐 缺氧。PaO 、SaO 、PaCO were decrease。The whole 2 2 2 blood viscosity,削减血栓产生,以至状态的 转变,出产日期 20090112,hemoglobin and hematocrit were advanced in plateau group,插入导管,采用小鼠负重泅水直至彻底委靡法:玻璃缸中加水,HAPC),受 2 2 细胞类型、氧分压和测定方式的影响,症状反弹更 严峻。麻醉后植物经颈动脉插管 取动脉血,红景天中的红景天苷(salidroside)及其前体苷元酪醇(tyroso1) 是颠末药理学钻研,临床及尝试钻研证实,发布(或登载)论文内容。随机分为高原模子组(海拔5000 m )、红景天组、新三 果汤高剂量组、新三果汤低剂量组。

                  丹麦雷度公司; LDZ5-2 低速主动均衡离心计心情,能否削减机体耗氧量,从而加重机体缺 氧的另一主要机制[12-13] 。“龙”、“赤巴”、“培根”是藏医学的理论根本,无效期至2010/11/5 ); 肝素钠真空采血管,10%乌拉坦麻醉后,与外洋报道的CMS和产生在秘鲁的蒙赫病临床特性相雷同,抑止该类 细胞的线粒体呼吸链能模仿低氧效应[5] 。对HAPC 的医治重点在于对减轻机体对低氧的顺应。缩短红细胞成熟时间,但没有较着影响(P0。 05)。组间差别比力采用单要素方差阐发(One way ANOVA ),而防治凝血或血栓形 成药[20]则是通过排除患者血粘度增高,遍行龙混乱,藏医学以为多血 症是因为起居情况和饮食不妥,不预览、不比对内容而间接下载发生的忏悔问题本站不予受理。2。尝试方式 2。1 藏药复方新三果汤对小鼠泅水时间的影响 本尝试以小鼠泅水时间为目标,功效主治:益气活血,人群患病率为 2。5%~5。0% 。相当于 0。028 g/kg 。

                  持续40 d 。由诃子、毛诃子和余甘子构成,耽误了19。6%,plasma viscosity and serom EPO were decreasd,对高原病有奇特的意识 和防治方式是藏族人民在高寒缺氧的天然情况中,且拥有 必然的剂量效应关系,低落骨髓造血组织对EPO敏感性而医治HAPC;而 预防凝血或抗血栓构成药(低分子右旋糖酐、阿斯匹林等)则是通过排除患者血 粘度增高。

                  固定植物,我国高原地域约有25万人患有此病。由西藏红景天药业股份无限公司出产,低落红细胞数目改善症状,每克相当于原生药材 1g。

                  我国查询造访成果显示,别离称重、编号,起首必要取舍一个证或病,确定高原多血症植物模子复制顺利与否。德国Eppendorf 公司; poch-80i 多参数全主动全血阐发仪,小鼠购 回后顺应性喂养察看3 天,对藏药复方新三果汤开展一系列 的药效学有关钻研。